如何制備HEPES緩沖液？這里有多種方法！

時(shí)間：2021-05-18作者：武漢德晟生化科技有限公司瀏覽：29

Hepes是一種通用的兩性離子緩沖劑，不結(jié)合，鈣，錳或銅離子。其中細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的緩沖液強(qiáng)度通常在10至25mm之間，在加入Hepes后，用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。必須注意保持培養(yǎng)基中的重量克分子滲透壓濃度，并且需要評(píng)估對(duì)于給定細(xì)胞系的毒性。根據(jù)文獻(xiàn)得到，HEPES在控制pH方面**碳酸。
Hepes的緩沖液可以通過(guò)好幾種方法來(lái)制備，可以將游離酸添加到水中，然后用大約一半摩爾當(dāng)量的或滴定至所需的pH?；蛘?，相等摩爾濃度的Hepes和Hepes鹽，可以將它們以大約相等的體積混合，然后用任一種溶液反滴定至合適的pH?？梢杂肏CL滴定鹽，得到一半當(dāng)量的氯化。但是，離子強(qiáng)度的增加會(huì)改變?nèi)芤旱闹亓靠朔肿訚B透壓濃度。Hepes半的大多數(shù)溶液都會(huì)溶解在水中，形成pH值7.5，幾乎不用做調(diào)整。
Hepes緩沖鹽水（2X）的倆種配方：
1、氯化1.6克
氯化0.074克
Na2HPO4二水合物0.027克
葡萄糖0.2克
HEPES，游離酸1克
將上述成分溶解在總體積為90毫升的蒸餾水中，用0.5 N NaOH調(diào)節(jié)pH到7.05，然后調(diào)節(jié)用蒸餾水定容至100毫升。通過(guò)0.22微米的過(guò)濾器對(duì)溶液進(jìn)行滅菌，分裝在-20°C下。
2、氯化16.4克
HEPES，游離酸11.9 g
Na2HPO4 0.21克
水 1升
加入上述成分并攪拌直至溶解，用5 M NaOH滴定至pH 7.05（準(zhǔn)確的pH值非常重要），篩選消毒。
在與轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)一起使用之前測(cè)試制劑，通過(guò)將0.5 ml的上述緩沖液與0.5 ml的250 mM CaCl2混合并渦旋進(jìn)行測(cè)試。應(yīng)形成細(xì)的沉淀物，該沉淀物在顯微鏡下很*看到。如果沒(méi)有形成沉淀，不要將這批緩沖液用于轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
綜上所述，便是我司提供的Hepes緩沖液的制備方法，希望這些信息可以幫到大家。當(dāng)然，如有采購(gòu)生物緩沖液可聯(lián)系我司，湖北新德晟材料有限公司專(zhuān)業(yè)生產(chǎn)Tris、Hepes、Mops等緩沖劑產(chǎn)品。截至目前公司也成立數(shù)十年，對(duì)生物緩沖劑的研發(fā)生產(chǎn)有著十分豐富的經(jīng)驗(yàn)?？梢源罅刻峁〩epes以及生物緩沖劑的其他型號(hào)產(chǎn)品，并且我司可為客戶進(jìn)行產(chǎn)品定制和專(zhuān)業(yè)售后服務(wù)，并可為特殊客戶進(jìn)行專(zhuān)業(yè)的產(chǎn)品樣品測(cè)試服務(wù)與包裝定制服務(wù)。


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