-20℃30分鐘--->-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。-20℃不可**過1小時(shí),以防止胞內(nèi)冰晶過大,造成蛋白胨細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃.." />
蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存一直是生物科技以及醫(yī)療行業(yè)的難題,如何克服冷凍過程中的種種弊端,科學(xué)合理的冷凍蛋白胨細(xì)胞一直是業(yè)內(nèi)人士追求的課題,其實(shí)蛋白胨細(xì)胞的冷凍技術(shù)也并不復(fù)雜。
關(guān)于蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存方法如下:
1·傳統(tǒng)方法: 冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。-20℃不可**過1小時(shí),以防止胞內(nèi)冰晶過大,造成蛋白胨細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
2·程序降溫:利用已設(shè)定程序的等速降溫機(jī)以-1~-3℃/分鐘之速度由室溫降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。適用于懸浮型細(xì)胞與hybridoma之保存。
冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基,使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。
配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養(yǎng)基、血清,逐滴加入二甲基亞砜(DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞,用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞,取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。
取與蛋白胨細(xì)胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液,并晃動(dòng)試管,制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO最后濃度為5~10%),使細(xì)胞濃度為1~5×106cells/ml,混合均勻,分裝于已標(biāo)示完全之冷凍保存管中,1~2mlial,并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后,注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。
詞條
詞條說明
蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存一直是生物科技以及醫(yī)療行業(yè)的難題,如何克服冷凍過程中的種種弊端,科學(xué)合理的冷凍蛋白胨細(xì)胞一直是業(yè)內(nèi)人士追求的課題,其實(shí)蛋白胨細(xì)胞的冷凍技術(shù)也并不復(fù)雜。關(guān)于蛋白胨細(xì)胞的冷凍保存方法如下:1·傳統(tǒng)方法: 冷存管置于4℃10分鐘--->-20℃30分鐘--->-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)--->液氮槽vaporphase長期儲(chǔ)存。-20℃不可**過1小時(shí),以防止胞
蛋白胨根據(jù)其純度不同,雜質(zhì)含量多少可以分出很多等級(jí),我國將各種化學(xué)試劑分成多個(gè)等級(jí),不同等級(jí)有不同的標(biāo)準(zhǔn),可用于不同的使用范圍。標(biāo)準(zhǔn)試劑:該類試劑為我國國家標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定,適用于檢驗(yàn)、鑒定、檢測?;鶞?zhǔn)試劑(PT,綠標(biāo)簽):作為基準(zhǔn)物質(zhì),標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)溶液。優(yōu)級(jí)純(GR,Guaranteed Reagent 綠標(biāo)簽)(一級(jí)品): 主成分含量很高、純度很高,適用于精確分析和研究工作,有的可作為基準(zhǔn)物質(zhì)。分析純(
分析純是化學(xué)試劑的一種純度規(guī)格,屬于二級(jí)品,標(biāo)簽為金光紅,用于重要分析和一般性研究工作。分析純是指做分析測定用的試劑,雜質(zhì)非常少,不妨礙分析測定。分析純蛋白胨在培養(yǎng)基領(lǐng)域非常多見,也有使用純度較高的標(biāo)準(zhǔn)。但是大多數(shù)培養(yǎng)基使用的蛋白胨都是分析純,那么為什么培養(yǎng)基對(duì)蛋白胨的要求這么高呢,除了分析純蛋白胨其他的等級(jí)蛋白胨不能代替嗎?我么來看看常用的培養(yǎng)基種類以及要求。1·組織培養(yǎng):也算是培養(yǎng)基的一種吧,
蛋白胨,英文名稱:peptone,是**化合物。蛋白胨是將肉、酪素或明膠用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外觀呈淡黃色的粉劑,具有肉香的特殊氣息。蛋白質(zhì)經(jīng)酸、堿或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃內(nèi)蛋白質(zhì)的初步消化產(chǎn)物之一就是蛋白胨。蛋白胨富含**氮化合物,也含有一些維生素和糖類。它可以作為微生物培養(yǎng)基的主要原料,在抗生素、醫(yī)藥工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)、生化制品及微生物學(xué)科研等領(lǐng)域中的用量均很大,可以用來**消化道
公司名: 湟中禾豐生物科技有限責(zé)任公司
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