現(xiàn)市場上常見的病毒樣本保存液的設計或針對于核酸的保護,會指向病毒功能蛋白的保護。例如針對核酸的樣本保存液中,通常含有dnase/rnase和其他功能酶的抑制作用,破壞功能蛋白,而主要保護功能蛋白的病毒樣本保存液,對于核酸的保護效果又不佳。第一類病毒樣本保存緩沖液較適用于pcr方法或其他分子檢測方法的使用,而第二類病毒樣本保存緩沖液較適用于病毒抗原或抗體的檢測,比如elisa或膠體金、熒光等快速檢測的使用。
目前病毒保存液的成分主要為Hank's液基礎、慶大霉素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白*五組分)、生物緩沖劑TRIS、氨基酸、冷凍保護劑、甘油等多種組分。
1、Hank's液:是一種平衡鹽溶液,主要用于細胞培養(yǎng)取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗。
2、慶大霉素、真菌抗生素:多種抗生素聯(lián)合,具有抗細菌和抗真菌的作用。
3、BSA (V):牛血清白蛋白(BSA)作為蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑,又稱*五組分,是牛血清中的一種白蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7,牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應用,可在病毒的蛋白質(zhì)外殼形成一種保護膜,使其不易分解,保證病毒的完整性,提高分離率;還可在western blot中作為Blocking agent;在酶切反應緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性。
4、生物緩沖劑TRIS:TRIS(三羥)緩沖液構(gòu)建的中性環(huán)境,有助于增加病毒的生存時間和感染穩(wěn)定性。
5、氨基酸:為病毒存活提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)。
6、冷凍保護劑:通常病毒保存液需要-70℃的低溫保存,冷凍保護劑可以較好的保護病毒完整性,加入冷凍保護劑可保護細胞免受溶液損傷和冰晶損傷。冷凍保護劑同溶液中的水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,同時冷凍保護劑可以通過在細胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度,降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,使細胞免受溶質(zhì)的損傷。
7.甘油:即丙三醇,甘油具有營養(yǎng)劑、干燥劑的作用。50%濃度的甘油使保存物處于相對靜止狀態(tài)。病毒對外界的抵抗力不強,對溫度敏感。
德晟是一家體外診斷試劑、采血管添加劑、生物緩沖劑、化學發(fā)光試劑研發(fā)生產(chǎn)和銷售為一體的高新科技企業(yè),生產(chǎn)的病毒保存液有滅活型和非滅活型,已為多家客戶提供產(chǎn)品,并得到客戶反映度很好,市場上報道出多個非滅活型病毒保存液出現(xiàn)長菌現(xiàn)象,但德晟在多次研究試驗下解決了這個問題。
詞條
詞條說明
? ?說到體外診斷,人們通常想到的是采血管添加劑,比如。肝素/ EDTA K2 /血凝塊活化劑/血清分離凝膠/ ACD / NaF ,以及化學發(fā)光分析,如魯米諾/異丁香醇/ DMAE-NHS,而實際圓圓不止這些。首先需要知道何為體外診斷。體外診斷是在人體活性細胞之外,通過對人體樣本(血液、體液、組織等)進行檢測而獲取臨床診斷信息,進而判斷疾病機體功能對應的產(chǎn)品和服務。體外診斷
*學的發(fā)展史起始于微生物學研究,于18世紀建立,19世紀至20世紀中期進入經(jīng)典發(fā)展期。這一時期,人們對*功能的認識由人體現(xiàn)象的觀察進入了科學實驗時期。20世紀初期到中期,進入近代*學時期。從20世紀中期開始,真正進入現(xiàn)代*學時期?,F(xiàn)代*學的檢測基本歷經(jīng)了以下幾個過程。利用抗原和抗體的特異性反應進行檢測,利用同位素、酶、化學發(fā)光物質(zhì)等對檢測信號進行放大和顯示,常被用于檢測蛋白質(zhì)、激素等微量
Tris-HCl與HEPES緩沖液的那些優(yōu)缺點和應用對比
在緩沖液中Tris-HCl與HEPES都是應用比較普遍的。為什么把它們兩個拿出來對比,這也是為了很好的讓大家了解到更多相關(guān)信息,以便在采購和使用過程中較準確。1、Tris-HCl緩沖液Tris緩沖液是在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑,其本身為弱堿,常用有效pH在“中性”范圍,Tris-HCl緩沖液:pH=7.5~8.5;Tris-鹽緩沖液:pH=5.0~9.0。1)Tris-HCl緩沖液
核酸檢測(實時熒光RT-PCR方法)是確診新冠肺炎的金標準,在核酸檢測的具體流程中,核酸提取是十分關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。根據(jù)已公開報道,TRIS、胍、EDTA等試劑在核酸提取中發(fā)揮著重要的作用。核酸是由許多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩類,是生命的較基本物質(zhì)之一。核酸提取是指利用物理、化學等方法將核酸從樣品中分離出來的過程,是核酸擴增、DNA片段連接、載
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