在各種非放*分析方法中,化學(xué)發(fā)光*分析(CLIA)具有靈敏度高、檢測(cè)范圍寬、精密度好、標(biāo)記物穩(wěn)定、可實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)化、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),以酯衍生物為發(fā)光標(biāo)記物的CLIA的特點(diǎn)是:標(biāo)記簡(jiǎn)單、標(biāo)記物穩(wěn)定、不需要催化劑、自然本底低、受外界干擾因素少、信噪比高、發(fā)光體系簡(jiǎn)單等。
酯是鹽的一個(gè)總稱(chēng),指一類(lèi)可用作化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物的化學(xué)物質(zhì),酯有多個(gè)不同的系列,包括鹽DMAE-NHS、酯NSP-DMAE-NHS、鹽NSP-SA等,接下來(lái)將介紹酯DMAE-NHS的合成方法和性能、優(yōu)勢(shì)介紹。
酯DMAE-NHS合成路線:
1.將4-羥基-3,5-二與N-羥基琥珀酰亞胺溶解在N,N-二甲酰胺(DMF)中,在縮合劑的作用下反應(yīng)得到粗產(chǎn)品,重結(jié)晶后得純產(chǎn)品;
2.將1所得產(chǎn)品1-((4-羥基-3,5-二甲酰)氧基)-2,5-烷二酮與-9-羰基氯溶解在無(wú)水吡啶中,在催化劑的作用下加熱反應(yīng)得到粗產(chǎn)品,柱層析分離提純。
3.將2所得產(chǎn)物與酸二溶解在無(wú)水甲中反應(yīng),將得到的混合物過(guò)濾,濾渣洗滌然后重結(jié)晶得到目標(biāo)產(chǎn)物酯類(lèi)化學(xué)發(fā)光底物DMAE-NHS。
DMAE·NHS的發(fā)光性能介紹
1.對(duì)DMAE-NHS發(fā)光性能的研究表明,DMAE-NHS的發(fā)光為閃光,0.4s時(shí)發(fā)光強(qiáng)度達(dá)到較大,發(fā)光半衰期約為0.9s,發(fā)光強(qiáng)度為6.11×1018cps/mol。發(fā)光啟動(dòng)試劑的組成對(duì)其發(fā)光強(qiáng)度有影響,表面活性劑如CTAC,TritonX-100,Tween-20等能增強(qiáng)其發(fā)光。
2.DMAE-NHS與抗體偶聯(lián)物DMAE-NHS-Ab的發(fā)光性能相似,DMAE-NHS與Ab的分子比為2.4時(shí)其發(fā)光強(qiáng)度為1.8×1019cps/molAb。DMAE-NHS及DMAE-NHS-Ab具有良好的熱穩(wěn)定性,4℃或冰凍下,在pH7.0的PB緩沖液中,半年后它們的發(fā)光活性或*活性基本沒(méi)有下降,室溫或37’C下,由于水解而降低發(fā)光活性,它們的熱穩(wěn)定性隨溫度升高而降低,隨熔液pH值增大而降低,
DMAE-NHS的優(yōu)勢(shì)介紹
研究結(jié)果表明,DMAE-NHS具有良好的發(fā)光性能,易與抗體偶聯(lián),偶聯(lián)物穩(wěn)定,發(fā)光體系簡(jiǎn)單,是一種理想的化學(xué)發(fā)光*分析標(biāo)記物,以DMAE-NHS做發(fā)光標(biāo)記物建立的TSHCLIA、TSHBAS-CLIA和TT4BAS-CLIA方法,標(biāo)準(zhǔn)曲線線性好、信噪比高、檢測(cè)范圍寬、具有較高的靈敏度,良好的精密度、準(zhǔn)確性和健全性,與IRMA方法及CibaComingCLIA的臨床測(cè)量值相關(guān)性良好。
酯發(fā)光體系優(yōu)勢(shì)明顯,在體外診斷方面具有較好的靈敏性,目前應(yīng)用酯化學(xué)發(fā)光*分析技術(shù)已逐漸發(fā)展為醫(yī)藥檢測(cè)、診斷分析、環(huán)境檢測(cè)、食品檢測(cè)等領(lǐng)域的一種趨勢(shì)。德晟科技提供質(zhì)量可靠的酯、鹽產(chǎn)品,可滿足科研機(jī)構(gòu)和試劑盒生產(chǎn)企業(yè)的科研、生產(chǎn)需求。
詞條
詞條說(shuō)明
TRIS、BICINE、HEPES緩沖液分別有什么優(yōu)缺點(diǎn)
生物緩沖液是一種能在加入少量酸或堿時(shí)防止PH值改變的溶液,PH緩沖系統(tǒng)主要用來(lái)維持生物的正常PH值,在生理環(huán)境中起到重要的作用。在生化研究實(shí)驗(yàn)中,也常常使用緩沖液來(lái)維持實(shí)驗(yàn)體系的酸堿度。由于不同實(shí)驗(yàn)中所需PH值范圍不同,也有很多生物緩沖液的種類(lèi)可供選擇,并且在不同的領(lǐng)域都各有優(yōu)缺點(diǎn)。以常用的幾種生物緩沖液來(lái)舉例,我們來(lái)看看生物緩沖液都各什么優(yōu)缺點(diǎn):1、TRIS-HCL緩沖液TRIS-HCL緩沖液在
關(guān)于生物緩沖劑TRIS,相信很多人都已經(jīng)見(jiàn)識(shí)到了它的神通廣大,護(hù)膚品、醫(yī)藥中間體、藥用輔料,緩沖劑中無(wú)處不見(jiàn)它的蹤影,不過(guò)它還有一個(gè)應(yīng)用是很多人不了解的,今天我們就來(lái)一探究竟,TRIS在涂料中到底起著怎樣的作用。TRIS在涂料制備過(guò)程中主要起到以下四種作用:pH調(diào)節(jié)劑、交聯(lián)促進(jìn)劑、聚酯涂料原料以及相變芯材。下面具體介紹一下TRIS是如何起到這幾種作用的。1.pH調(diào)節(jié)劑TRIS為弱堿,在25℃下,它
在許多生物實(shí)驗(yàn)中需要用緩沖液來(lái)維持有效的PH值,緩沖液對(duì)實(shí)驗(yàn)的成敗至關(guān)重要。選擇緩沖液時(shí)首先要考慮實(shí)驗(yàn)中的PH值與緩沖液PH值范圍一致,在考慮不同緩沖液的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)是否適合你的實(shí)驗(yàn)。生物緩沖液種類(lèi)很多,在本文中我們主要討論比較常用的幾種生物緩沖液的制備方法。1、制備TRIS堿和TRIS-HCL緩沖液Tris:制備 1 升 1M Tris 緩沖液,先準(zhǔn)備將121.14克Tris粉末溶解在750mL的
? Tris飽和為淺黃色透明液體,下層為相,,上層為T(mén)ris 緩沖液pH>7.8,是用Tris-HCl(pH8.0)飽和過(guò)的重蒸,有刺激性氣味,內(nèi)加有抗氧化的8-羥基。Tris飽和用于分離DNA。? Tris飽和的配置:冰箱取出重蒸,室溫放置,之后68度水浴溶化,切勿立即放入68度的水浴中,以防玻璃炸裂,加8-羥基至0.1%和β-巰基至0.2%
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