TRIS緩沖液和鹽緩沖液的區(qū)別

時(shí)間：2022-01-25作者：湖北新德晟材料科技有限公司瀏覽：316

生物緩沖液常用于生物化學(xué)研究實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，具有較為重要的意義，是一類能夠抵制外界少量強(qiáng)酸和強(qiáng)堿的影響，維持PH值基本不變的調(diào)節(jié)液。其中經(jīng)常使用的生物緩沖液有Tris 緩沖溶液、PBS緩沖溶液、CAPS緩沖液、MOPS緩沖液、TAPS緩沖液以及EPPS緩沖液。本文將從幾個(gè)方面對(duì)較常使用的Tris緩沖溶液和PBS緩沖溶液進(jìn)行對(duì)比介紹。

1.緩沖范圍

三羥（Tris）為弱堿，分子式為C4H11NO3，分子量為121.14，在25 °C下pKa為8.1，其緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0~9.2之間。在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的pH值為6.8、7.4、8.0、8.8。Tris被廣泛用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的緩沖液的制備，甚至有**過鹽緩沖液的趨勢(shì)。

鹽緩沖液（PBS）是以鹽為pH緩沖，氯化為滲透壓平衡的鹽溶液，通常使用的有緩沖液和緩沖液。由于它們有二級(jí)解離，緩沖的pH值范圍很廣，是生物化學(xué)研究中使用較為廣泛的一種緩沖溶液。

2.配置方法

配制Tris-HCl緩沖液的方法有兩種：分別配制 Tris和 HCl溶液，然后按常用表中所列體積混合即可。但是由于標(biāo)準(zhǔn)濃度的稀不易配制，所以常用另一種方法：以配置Tris-HCl緩沖液為例：先將 Tris堿溶于950 mL～970 mL 去離子水中，邊攪拌邊滴加 HCl，用pH計(jì)測(cè)定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水進(jìn)去即可。

鹽緩沖溶液的配制方法： 稱 NaCl， KCl， KH2PO4和K2HPO4，溶于800 mL 蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1 L。保存于4 ℃冰箱中即可。需要注意的是，通常所說的濃度指的是緩沖溶液中所有的根濃度，而非Na+或K+的濃度，Na+和K+只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。配置鹽緩沖溶液時(shí)鹽比鹽好，鹽在低溫下不容易溶解，而鹽的溶解度相對(duì)高一些。

3.使用領(lǐng)域

Tris緩沖溶液  在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑；Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)還可用于線蟲的中間纖維的形成；在Tris緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ)；將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成，獲得“TAE緩沖液”，換成可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。

鹽緩沖溶液  一般的有活性的生物制劑都要用鹽緩沖溶液來稀釋。原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整適宜pH值的緩沖作用。蒸餾水不具有鹽平衡作用，會(huì)破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性；生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用，對(duì)完整的、有活性的物質(zhì)不能保證其在較適條件下參與生物反應(yīng)，所以使用PBS是可以選擇。當(dāng)然，PBS也不是**的，有的生物活性物質(zhì)需要的條件比較高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持較佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其較完整的特性。因此PBS主要用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，其緩沖范圍較適宜在中性。

在生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中要慎重地選擇緩沖溶液，不僅要考慮緩沖液的緩沖范圍，還要綜合考慮緩沖液的使用環(huán)境。湖北新德晟材料專業(yè)生產(chǎn)研發(fā)生物緩沖液已有多年，德晟擁有獨(dú)立的研發(fā)團(tuán)隊(duì)，對(duì)產(chǎn)品的研發(fā)生產(chǎn)已有十分豐富的實(shí)戰(zhàn)經(jīng)驗(yàn)。目前德晟出品的生物緩沖液等產(chǎn)品，已銷往**多個(gè)國(guó)家，均收到**復(fù)購(gòu)，與眾多國(guó)外客戶達(dá)成長(zhǎng)期合作。如果你有意向了解的話，可以來電咨詢，德晟歡迎您的來電。


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