玉米赤霉烯酮免疫親和柱

時間：2021-09-26作者：河北藝心逸意科技有限公司瀏覽：257

玉米赤霉烯酮免疫親和柱

簡介
ZEN免疫親和柱適用于基質(zhì)復(fù)雜、**要求低的樣品中玉米赤霉烯酮檢測的凈化?？梢赃M行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的定量分析，適用于谷物，食品，飼料等的樣品凈化過程。
儲存條件：2 8 冷藏保存， 不可冷凍
1、用途：用于實驗室凈化樣品提取物以進行進一步分析
2、概要：玉米赤霉烯酮首先從有赤霉病的玉米中分離得到 玉米赤霉烯酮其 產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬的菌 株玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物 。
玉米赤霉烯酮具有雌激素作用，能造成動物急慢性中毒，引起動物繁殖機能異常甚至死亡 對人類的健康也造成很大威脅。**對食品，飼料中的玉米赤霉烯酮都有嚴格的**標準。
3、原理：測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng)，免疫親和柱中含有和玉米赤霉烯酮抗體結(jié)合在一起的凝膠， 樣品中的玉米赤霉烯酮經(jīng)過提取、過濾、稀釋，然后緩慢的通過免疫親和層析柱，在免疫親和柱內(nèi) 玉米赤霉烯酮 與抗體結(jié)合， 其他的無關(guān)物質(zhì)不會結(jié)合而直接通過免疫親和柱， 之后洗滌免疫 親和柱除去沒有被結(jié)合的其他無關(guān)物質(zhì)。 最后加入甲醇將玉米赤霉烯酮 釋放， 然后注入到分析儀器中 進行進一步的檢測。
4、產(chǎn)品信息
貨號、規(guī)格、數(shù)量、柱容量
C14003、1mL、25支、≥500ng
C15003、3mL、20支、≥750ng
C15007、3mL、20支、≥1500ng
C15207、3mL、100支、≥1500ng
5、操作者應(yīng)注意事項：
? 玉米赤霉烯酮對人體有害，應(yīng)戴手套操作。
? 使用過的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液較好用5%濃度的次氯酸鈉溶液浸泡過夜。
? 不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
? 親和柱于2 8 冷藏保存，不可冷凍。
? 使用前，免疫親和層析柱需回至室溫 22 25 ℃）。
6、操作流程
? 粉碎好的樣品過20 目篩并在取樣前徹底混合，不立即分析的樣品應(yīng)放在冰箱中儲存。
? 稱取20g 粉碎樣品及4g 氯 化鈉，加入100mL90% 乙腈/水。
? 高速均質(zhì)約5 分鐘，或震蕩器震蕩約30 分鐘。
? 4000轉(zhuǎn)離心5min或普通定量濾紙過濾。
? 取5mL 濾液加入20mL 純水，徹底混合用玻璃纖維濾紙過濾至澄清
? 將10mL 注射器連接于免疫親和柱上端。
? 取處理好的樣液10mL10mL（相當(dāng)于0.4g 樣品）以1 2滴/秒的速度通過免疫親合柱，棄掉流出的液體。
? 加10mL 水淋洗柱子兩次，棄掉流出的液體。
? 利用真空設(shè)備壓入空氣或用注射器吹干柱中水分。
? 加入1mL 甲醇緩慢洗脫，流速約為2 3 秒每滴。
? 收集全部洗脫液于干凈的比色皿或其他容器中用于檢測。
*糧谷類樣品用水稀釋，發(fā)酵類或雜質(zhì)干擾很大的樣品提取液，則用20mMPBS進行較大倍數(shù)的稀釋（一般為10倍），以確保親和柱中玉米赤霉烯酮抗體與樣品提取液中抗原特異性結(jié)合的能力不受影響。
*20mMPBS：0.62g NaH 2 PO 4 ?2H 2 O + 5.73gNa 2 HPO 4 12H 2 O+9g NaCl ，蒸餾水溶解并定容至1000 mL ，調(diào) PH 至 7.4 。



7、操作流程圖操作流程圖



8、液相色譜測定條件液相色譜測定條件
? 液相色譜柱：C18柱（柱長150mm，柱內(nèi)徑4.6mm；填料粒徑5μm），或相當(dāng)者；
? 熒光檢測器：激發(fā)/**波長：274nm/440nm
? 流動相：乙腈-水-甲醇（46+46+8）
? 流速：1mL/min
? 進樣量：20μL
? 柱溫：35℃
用進樣器吸取玉米赤霉烯酮標準工作液注入高效液相色譜儀，在上述色譜條件下測定標準溶液的響應(yīng)值（峰 高或峰面積），得到玉米赤霉烯酮標準溶液高效液相色譜圖。


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