【黃曲霉毒素親和柱】黃曲霉毒素怎么檢測(cè)

時(shí)間：2021-06-15作者：河北藝心逸意科技有限公司瀏覽：1094

黃曲霉毒素怎么檢測(cè)


1、薄層分析法(TLC)

TLC法是檢測(cè)黃曲霉素較為經(jīng)典的方法，也是以前較為常用的方法，至今仍為一些檢測(cè)機(jī)構(gòu)所用，也是一種標(biāo)準(zhǔn)方法。其原理是針對(duì)不同的試樣，用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來，經(jīng)柱層析凈化后，再在薄板上展開后分離。

利用黃曲霉素的熒光特性，根據(jù)熒光斑點(diǎn)的強(qiáng)弱與標(biāo)準(zhǔn)比較確定其含量，對(duì)于一些組分很復(fù)雜的試樣要雙向展開，才能獲得較高的靈敏度。

TLC法設(shè)備簡(jiǎn)單，檢測(cè)*，但操作繁瑣、費(fèi)時(shí)，萃取和凈化效果不理想，靈敏度差，對(duì)操作人員的身體健康存在較大程度的危害。

2、液相色譜法(HPLC)

HPLC法是近年來發(fā)展起來的一種檢測(cè)方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統(tǒng)分離，再用熒光檢測(cè)器測(cè)定。與其配套的柱后衍生系統(tǒng)有碘衍生化法、溴衍生化法及較為**的電化學(xué)衍生化法和光化學(xué)衍生化法。當(dāng)前，該方法大多用親和柱來凈化、分離，其凈化效果優(yōu)異。

該法能準(zhǔn)確地分離不同種類的黃曲霉素(例如：AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等)，檢測(cè)速度快且定性與定量準(zhǔn)確，檢測(cè)限低，可作為仲裁法使用，但儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理方法相對(duì)繁瑣，若用到親和柱則會(huì)使試樣檢測(cè)費(fèi)用增加，對(duì)操作人員的身體健康仍存在一定的危害。

3、酶聯(lián)法(ELISA)

ELISA法也是近年來研究開發(fā)出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據(jù)抗體和抗原之間特異性的學(xué)反應(yīng)，最后用測(cè)定酶活力的方法來增加測(cè)定的靈敏度。

該方法檢測(cè)速度快、對(duì)人體危害小、但重復(fù)性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽(yáng)性概率較高、需要配置專門的酶標(biāo)儀，且對(duì)一些富含鹽和脂肪的試樣需進(jìn)行額外的處理。

4、毛細(xì)管電泳法(CE)

毛細(xì)管電泳(CE)也是一種新發(fā)展起來的分析黃曲霉素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測(cè)器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。

Wei等用毛細(xì)管電泳一激光減弱熒光檢測(cè)器測(cè)定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1，**了較為理想的分離效果，其中對(duì)AFB2的測(cè)定較為靈敏。但CE法的成本較高，操作復(fù)雜，不適宜在試樣檢測(cè)中廣泛應(yīng)用。

5、熒光光度法(IA C/S FB)

IA C/SFB法也是一種常用的標(biāo)準(zhǔn)方法。該方法的原理是利用各種黃曲霉素的熒光特性差異用熒光光度計(jì)測(cè)定試樣中黃曲霉素的含量。

該方法對(duì)檢測(cè)人員身體健康無危害，檢測(cè)速度*，靈敏度高，適用于大量試樣檢測(cè)，且定量準(zhǔn)確，但檢測(cè)費(fèi)用較高，需要配置專用設(shè)備，且不能對(duì)單一的毒素進(jìn)行檢測(cè)。

6、金標(biāo)試紙法

金標(biāo)試紙法，實(shí)際就是一種固相分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結(jié)合反應(yīng)，可一步檢測(cè)黃曲霉素。

該法可在5～10 min內(nèi)完成對(duì)試樣中黃曲霉素的定性測(cè)定，具有簡(jiǎn)單、快速的特點(diǎn)，且無須其他儀器設(shè)備的配合，既可在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行檢測(cè)，也可在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行實(shí)地測(cè)定，但是其檢測(cè)的準(zhǔn)確度、精度有待進(jìn)一步的研究。

7、生物傳感器法

生物傳感器是使用固定化技術(shù)將具有分子識(shí)別能力的生物活性物質(zhì)與物理化學(xué)換能器結(jié)合，可以用來探測(cè)生物體內(nèi)外的環(huán)境化學(xué)物質(zhì)或與之起特異性交互作用后產(chǎn)生響應(yīng)的一種裝置。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物傳感器為傳感器口。

根據(jù)能量轉(zhuǎn)換器所傳導(dǎo)的物理或化學(xué)信號(hào)的不同，傳感器可分為電化學(xué)傳感器、光學(xué)傳感器、壓電晶體傳感器等。由于生物傳感器具有選擇性高、響應(yīng)快、操作簡(jiǎn)單、攜帶方便和適合于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，因此各國(guó)科研工作者正積極探索研制新型生物傳感器用于檢測(cè)黃曲霉素。



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