【銅綠假單胞菌殺菌率測試】

時間：2021-04-12

面臨日益嚴重的水環(huán)境污染問題，礦泉水桶裝水成了人們?nèi)粘ｏ嬎闹匾姆绞剑瞧渲秀~綠假單胞菌含量**標的事件卻又時有發(fā)生，所以對銅綠假單胞菌的是十分必要的。那么銅綠假單胞菌又該如何呢？

標準濾膜法

桶裝水中銅綠假單胞菌的方法是GB 8538-2016《食品安全國家標準飲用**礦泉水方法》。銅綠假單胞菌產(chǎn)色素分為三種：產(chǎn)綠膿菌素，產(chǎn)青膿素，產(chǎn)紅膿素；銅綠假單胞菌在4℃不生長而在42℃可以生長；具有氧化酶，可以使細胞色素C氧化，再由氧化型細胞色素C使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物：可以產(chǎn)生一種脫酰胺酶，可使乙酰胺經(jīng)脫酰胺作用釋放氨，滴加納氏試劑（碘化汞鉀），氨在堿性條件下與碘化汞鉀作用，生成紅色絡合物；根據(jù)這些生化特性，通過濾膜過濾將銅綠假單胞菌富集到CN瓊脂上，再用生化試劑管進行生化鑒定。也可以用VITEK 2 Compact 全自動細菌鑒定系統(tǒng)用于微生物鑒定，準確率高，可用于微生物實驗室的日常工作。

實時熒光定量PCR

外毒素 A 基因在銅綠假單胞菌中高度保守，根據(jù) GenBank 中銅綠假單胞菌外毒素A基因片段序列，設計特異性引物及TaqMan探針，并利用實時熒光 PCR技術，對目標靶序列進行特異性擴增，建立了一套食品中銅綠假單胞菌的方法，特異性試驗和靈敏性試驗良好，該方法具有特異、快速的特點，能夠滿足要求，為食品中銅綠假單胞菌的快速奠定了基礎。

LAMP

環(huán)介導等溫擴增技術（以下簡稱LAMP）：利用鏈置換DNA聚合酶在等溫條件下進行反應，40min內(nèi)可完成核酸擴增，過程不需要昂貴的儀器設備，簡單的水浴鍋即可，擴增產(chǎn)物不需要繁瑣的電泳過程，快速靈敏，特異性強，成本低，尤其適合大量、即時、現(xiàn)場的病原微生物的初篩，易于在基層推廣應用。

酶底物法

酶底物法（Pseudalert）采用特異性固定底物技術，目標細菌產(chǎn)生能夠分解 Pseudalert 底物特定的酶，產(chǎn)生熒光，在24 h內(nèi)即可得到結果，*進行驗證試驗，該方法能夠較好地彌補傳統(tǒng)濾膜法在工作中的不足，在美國和歐洲部分地區(qū)已經(jīng)被批準為銅綠假單胞菌的標準方法。

詞條
詞條說明
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