Tris,Mops,Hepes等緩沖液要如何從中選擇一款合適的

時間：2022-01-11

為實驗選擇合適的生物緩沖液（Tris,Mops,Hepes,Pipes等）可能很棘手，緩沖區(qū)選擇過程就像玩“猜猜誰”。像游戲一樣，一般來說，可以從非常廣泛的緩沖區(qū)列表開始，然后慢慢地提出問題和研究答案以縮小選擇范圍。

在下文將給大家提供一些選擇生物緩沖液的注意事項。

1、確定實驗的pH：

在許多實驗中，需要更改條件以使蛋白質(zhì)在溶液中保持**狀態(tài)。舉個例子，假設(shè)在pH 7.4的條件下進行了模擬生物條件的實驗，但是蛋白質(zhì)在此pH值下不穩(wěn)定，因此需要優(yōu)化這種情況。要注意的是，目標pH值通常離蛋白質(zhì)等電點（pI）大約一個pH單位（有時稍遠）。pI是給定的分子或蛋白質(zhì)不帶凈電荷的pH值。當?shù)鞍踪|(zhì)達到其pI時，它的溶解度就不那么高。

2、考慮不必要的緩沖區(qū)交互：

決定使用哪個緩沖區(qū)的另一個重要步驟是確定是否存在負緩沖區(qū)交互。舉個例子，如果正在使用一種酶，那么**緩沖液可能會影響酶功能的好壞。

3、實驗時需要考慮到的一些問題：

就像游戲一樣，可以提出一些問題，以確保獲得正確的緩沖。舉個例子，1.溶液中是否存在可能于緩沖液絡(luò)合的金屬？2.目標蛋白是一種酶嗎？它屬于哪一類？3.配體結(jié)合，蛋白質(zhì)穩(wěn)定性或電泳的離子強度要求是什么？像這樣的一些問題根據(jù)實驗時的具體情況來提問并思考，將進一步幫助找到合適的生物緩沖液（Tris,Mops,Hepes等）

4、考慮下游實驗時會有什么影響：

研究人員經(jīng)常遇到的一個絆腳石是，他們將從緩沖區(qū)開始，并發(fā)現(xiàn)它不適用于下游應(yīng)用程序。舉個例子，已知Tris會對Bradford assay產(chǎn)生負面影響。其他生物緩沖液會對質(zhì)譜產(chǎn)生負面影響。不幸的是，在執(zhí)行*1步和*2步之后，可能已經(jīng)縮小了緩沖區(qū)的范圍，只是發(fā)現(xiàn)它在將來可能無法很好地工作。這就像“猜猜誰”的噩夢般的版本。在這種情況下，必須進行一些研究以找到合適的替代方法。但是，既然已經(jīng)縮小了所需的特征，那么進行這項研究就會容易一些。

5、尋找合適的緩沖區(qū)：

當知道要使用什么緩沖區(qū)時，就應(yīng)該區(qū)采購緩沖區(qū)了。對于大多數(shù)研究人員而言，底價和純度基本上是在哪里購買緩沖液的重要標準。當然，也可以去找大品牌的公司，那么將會獲得合適的產(chǎn)品。但是，其價格也一定不會便宜。取而代之，湖北新德晟材料有限公司具有不斷增長的高質(zhì)量緩沖液產(chǎn)品，而且價格將會是您心里的zui佳價位。

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詞條說明
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