軍團菌檢測方法

時間：2022-06-17作者：廣州市微生物研究所集團股份有限公司瀏覽：496

軍團菌檢測方法
一、軍團菌簡介
軍團菌是一種環(huán)境感染性致病菌，可引起急性呼吸道傳染病，即軍團菌病。軍團菌分布較其廣泛，醫(yī)院、酒店等的供水系統(tǒng)、空調(diào)的冷卻系統(tǒng)等各種水源均易于滋生、污染軍團菌，并造成軍團菌病傳染的風(fēng)險。即與水有關(guān)的地方均可能存在軍團菌。軍團菌傳播、感染有以下特點：
1、透過空氣、水份感染，傳播帶季節(jié)性，**過50％病例在夏季發(fā)生。
2、滋生在醫(yī)院、酒店的供水系統(tǒng)，通過過水龍頭、浴室傳播。
3、可通過空調(diào)的冷卻系統(tǒng)，由通風(fēng)口傳播并感染對象。
軍團菌屬革蘭氏陰性桿菌，專性需氧，無芽孢，無莢膜，軍團菌需要半胱氨酸和鐵，無半胱氨酸時，軍團菌無法生長。生化特征還有不發(fā)酵也不氧化糖類，不還原硝酸鹽，氧化酶實驗陰性或弱陽性，尿素酶陰性，軍團菌生長的較適pH為6.9-7.0，2％－5％CO2能促進部分菌株的生長。軍團菌生長緩慢，易于被其它菌落覆蓋。軍團菌的菌落顏色多樣，通常呈白色、灰色、藍色或紫色，也能顯深褐色、灰綠色、深紅色。菌落整齊，表面光滑，在紫外燈下，有熒光。軍團菌屬有41個種，61個血清型。侵肺軍團菌（Legionella pneumophila, LP）有


15個血清型，是引起軍團菌病的主要菌型（占80%以上）。軍團菌病是一種急性呼吸道傳染病，臨床類型目前至少有肺炎型與龐蒂阿克熱型。本病主要為呼吸道飛沫(氣溶膠)傳播。目前尚無證據(jù)表明感染者、病人或感染動物作為本病的傳染源，通常把傳染本菌的水源(**水、人工管道水源、冷卻塔、冷熱管道系統(tǒng)水等)作為傳染源。



二、軍團菌的檢測方法——ISO11731:1998 
1．范圍
本標準描述了一種用于軍團菌分離和估計環(huán)境樣品中軍團菌數(shù)量的培養(yǎng)方法。
該方法適用于所有環(huán)境樣本，包括飲用水、工業(yè)用水和**水以及沉淀物、沉積物和粘土/軟泥等相關(guān)樣本。
2．培養(yǎng)基和試劑
2.1 BCYE培養(yǎng)基(也可用硝酸鐵瓊脂代替) 
2.2 BCYE-Cys(不含L-半胱氨酸) 
2.3 GVPC培養(yǎng)基
2.4酸處理緩沖液
3．取樣
3.1取樣容器
水樣可采用玻璃、聚乙烯或類似容器。以前用過的容器應(yīng)該清洗干凈、扣干水分，121℃高壓滅菌15min。如果容器不能經(jīng)受高壓滅菌，應(yīng)在**70℃的流動熱水或流動蒸汽中處理至少5min。
3.2含生物防腐劑的樣品
如果水樣中含有或被認為含有氧化型生物防腐劑，應(yīng)在取樣時或取樣前加入非活性試劑加以中和。如果水樣中含有消毒劑，需在采樣前或采樣后加入中和劑，含氯或氧化型消毒劑可用硫代硫酸鈉或硫代硫酸鉀作中和劑。
原則上講，實驗室接到水樣后應(yīng)盡快進行微生物學(xué)分析，較好是取樣當(dāng)天，尤其對于已知含生物防腐劑的樣品。因此，建議從樣品采集到制備好濃縮樣的間隔較好為2d，不應(yīng)**過5d，較長不**過14d。
3.3樣品運輸


樣品應(yīng)在6-18℃條件下被運輸，應(yīng)避免熱和光照，較好在1d內(nèi)，不**過2d將樣品送到*實驗室。

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