凱氏定氮儀測(cè)定粗蛋白的步驟

時(shí)間：2024-12-27作者：杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司瀏覽：129

1 原理
在樣品消化液中加入適量鋁片和固氫氧化納，從而利用強(qiáng)堿與鋁反應(yīng)產(chǎn)生氫氣和大量熱，使樣品消化液中的按鹽以氨的形式排出：
NH3隨著HZ進(jìn)入硼酸吸收液被吸收，后通過鹽酸滴定硼酸吸收液所消耗的體積數(shù)，即可確定樣品中粗蛋白含量。
2 材料與方法
2.1材料
2.1.1試劑分析純固體**。鋁片：用輸液瓶鋁蓋，每個(gè)剪成4小片，并預(yù)先用5%NaOH浸泡數(shù)分鐘，然后用清水洗至中性，涼干；也可用鋁電線打壓成片狀，經(jīng)洗滌處理。其它試劑同GB.
2.1.2樣品面粉、不米面、小米、大米，
2.2方法
2.2.1樣品消化同GB方法。
2.2.2瀏定取5ml定容混勻的消化液于25oml三角瓶中，加新蒸餾水Zoml,加29鋁片，后加59固體NaOH,立即蓋上帶有彎管的橡皮塞，并將彎管末端插入盛有30ml%硼酸液內(nèi)km深處（硼酸液預(yù)先加2滴混合指示劑），反應(yīng)10分鐘。取下吸收瓶，用olmol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定至淺紫色即達(dá)終點(diǎn)，同時(shí)做空白試驗(yàn)，然后根據(jù)滴定消耗鹽酸量，按GB計(jì)算公式計(jì)算樣品粗蛋白干基含量。
3 結(jié)論與討論
3.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1.1對(duì)比實(shí)驗(yàn)在與原標(biāo)準(zhǔn)方法對(duì)比試驗(yàn)中，二者結(jié)果無顯著差異（P>0.05）月。改進(jìn)法測(cè)定結(jié)果略高八方么。實(shí)驗(yàn)見表1
3.1.2準(zhǔn)確度與精度實(shí)驗(yàn)選用分析純錢作標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行含氮量試驗(yàn)，其結(jié)果見表2.由表2可見，改進(jìn)法測(cè)定按含氮量的標(biāo)準(zhǔn)差為0.03,變異系數(shù)為0.2%,相對(duì)誤差0.52%.
3.2方法討論
3.2.1本法特點(diǎn) 所需凱氏定氮儀設(shè)備簡(jiǎn)單，試劑亦較為普通，操作較為簡(jiǎn)便、快速，*加熱設(shè)備，既節(jié)約費(fèi)用，又便于基層推廣。
3.2.2實(shí)驗(yàn)條件
選擇本法中固體NaOH和鋁片的使用量直接影響著樣品消化液中氨的蒸餾與吸收程度，為此，我們用已知蛋白質(zhì)含量樣品，并采取其它實(shí)驗(yàn)條件不變，而僅改變某一條件量進(jìn)行了鋁片、固體NaOH加入量和蒸餾反應(yīng)時(shí)間的試驗(yàn)，初步結(jié)果我們認(rèn)為：鋁片29,固N(yùn)aOH5g,反應(yīng)蒸餾時(shí)間10分鐘，即可達(dá)到較滿意的測(cè)定效果。
3.2.3實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
3.2.3.1實(shí)驗(yàn)中有大量HZ放出，所以需注意避免明火。
3.2.3.2樣品消化液要隨稀釋隨蒸餾測(cè)足，不能放置太久，否nylJ影響測(cè)定結(jié)果。
3.2.3.3加入鋁和**時(shí)。其順序不可顛倒，且鋁片不要剪得過碎，否則，產(chǎn)生H:速度過快，會(huì)影響硼酸對(duì)氨的吸收效果。
3.23.4蒸燦元畢后樣品殘液堿度較大，需注意防腐和；另外，導(dǎo)管末端需用少量蒸餾水沖洗二次，洗液入硼酸吸收液。
杭州川一實(shí)驗(yàn)儀器有限公司專注于全自動(dòng)氮吹儀,一體化蒸餾儀,光化學(xué)反應(yīng)儀,氮?dú)獍l(fā)生器,分子蒸餾儀等, 歡迎致電 17366658694

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